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            小鼠單核巨噬細胞需要怎樣的培養條件?

            更新時間:2022-06-15  |  點擊率:1252
              小鼠單核巨噬細胞是機體重要的免疫細胞,具有抗感染、抗腫瘤和免疫調節等重要作用。①抗感染:非特異性吞噬殺傷多種病原微生物,是機體非特異性免疫防御中的重要細胞。②提呈抗原、啟動免疫應答:在特異性免疫應答中,絕大多數TD抗原(胸腺依賴抗原)都需經巨噬細胞吞噬和加工處理,并與其表面的MHC分子形成抗原肽-MHC復合物,表達在細胞膜表面,提呈給T細胞。巨噬細胞表面有很多黏附分子,可與T細胞表面的協同刺激分子受體結合,產生協同刺激信號,誘導T細胞的活化,啟動免疫應答。③抗腫瘤:巨噬細胞被某些細胞因子如IFN-γ激活后能有效地殺傷腫瘤細胞,是參與免疫監視的重要效應細胞。④免疫調節:在特異性免疫應答中,巨噬細胞可分泌釋放多種細胞因子,參與免疫調節。
              

            小鼠單核巨噬細胞

             

              小鼠單核巨噬細胞具有較廣泛的造血活性,可刺激中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞的增殖、分化和功能活性。主要用于腫瘤化療或放療引起的粒細胞減少。用于異體或自體骨髓移植,加速骨髓功能恢復,亦用于骨髓異常增生綜合征。
              
              小鼠單核巨噬細胞的培養環境與一般貼壁細胞并無差異。即培養箱溫度為37℃,CO2濃度為5%。推薦的培養基為DMEM+10%的胎牛血清;實際上,經研究者們實驗發現高糖型DMEM培養的RAW264.7細胞傳代后貼壁更快、細胞生長速度更快。因此,推薦使用高糖型DMEM,FBS濃度為10%,作為RAW264.7細胞的培養基。
              
              關于RAW264.7細胞的傳代方法,ATCC推薦使用細胞刮刀。也可采用0.25%的胰酶消化或采用彎嘴吸管吹打等方法。采用細胞刮刀進行傳代時,細胞能較大限度被收集起來,但會對細胞造成機械性損傷、影響細胞形態及貼壁時間等。采用胰酶消化時,由于RAW264.7細胞貼壁較牢,消化時間就較長。但消化時間點不易把握,易消化過度,對細胞生長造成抑制。
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